請問普通明視野光學顯微鏡.暗視野顯微鏡.相差顯微鏡.微分干涉顯微鏡各自的結構上有什麼不同以及觀察的效果有什麼不同.

題目:

請問普通明視野光學顯微鏡.暗視野顯微鏡.相差顯微鏡.微分干涉顯微鏡各自的結構上有什麼不同以及觀察的效果有什麼不同.

解答:

大二生物科學專業的知識吧 生活的細菌在【明視野顯微鏡】下觀察是透明的,不易看清.暗視野顯微鏡的原理與來自縫隙的一束強光通過暗室時,可清楚地看到其中細微灰塵的現象是一樣的,即給樣品照明的光不直接穿過物鏡,而是由樣品上反射或折射的光進入物鏡,那麼,在漆黑的視野中,由於反差增大了,使樣品能夠看得更清楚.因用暗視野法可以在黑暗的視野中看到光亮的菌體,故在觀察生活細菌及細菌運動時常採用此法.【暗視野顯微鏡】的構造主要是採用一種特殊的聚光器,在聚光器的下方中央爲圓形黑盤所遮,光僅由周緣進入,使光會聚於載玻片上,並斜照物體,物體經斜射照明後,發出反射光可進入物鏡,這樣,造成顯微鏡視野黑暗,而其中的物體明亮.如無暗視野顯微鏡時,只需將明視野顯微鏡上的聚光器取下,換上暗視野聚光器即可;也可在明視野顯微鏡聚光器下面的濾光鏡支架上放一片星形擋板(star diaphragm)(圖Ⅲ-6)構成暗視野,這種方法適用於低倍鏡觀察.在暗視野中,由於有些活細胞其外表比死細胞明亮,所以暗視野也被用來區分死、活細胞,此技術現已被用於各種酵母細胞的死、活鑑別.【相差顯微鏡】具有兩個其他顯微鏡所不具有的功能:①將直射的光(視野中背景光)與經物體衍射的光分開;②將大約一半的波長從相位中除去,使之不能發生相互作用,從而引起強度的變化.相差顯微鏡的基本原理是,利用物體不同結構成分之間的折射率和厚度的差別,把通過物體不同部分的光程差轉變爲振幅(光強度)的差別,經過帶有環狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實現觀測的顯微鏡.主要用於觀察活細胞或不染色的組織切片,有時也可用於觀察缺少反差的染色樣品.【微分干涉顯微鏡】的物理原理完全不同於相差顯微鏡,技術設計要複雜得多.DIC利用的是偏振光,有四個特殊的光學組件:偏振器(polarizer)、DIC稜鏡、DIC滑行器和檢偏器(analyzer).偏振器直接裝在聚光系統的前面,使光線發生線性偏振.在聚光器中則安裝了石英Wollaston稜鏡,即DIC稜鏡,此稜鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光(x和y),二者成一小夾角.聚光器將兩束光調整成與顯微鏡光軸平行的方向.最初兩束光相位一致,在穿過標本相鄰的區域後,由於標本的厚度和折射率不同,引起了兩束光發生了光程差.在物鏡的後焦面處安裝了第二個Wollaston稜鏡,即DIC滑行器,它把兩束光波合併成一束.這時兩束光的偏振面(x和y)仍然存在.最後光束穿過第二個偏振裝置,即檢偏器.在光束形成目鏡DIC影像之前,檢偏器與偏光器的方向成直角.檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有相同偏振面的兩束光,從而使二者發生干涉.x和y波的光程差決定著透光的多少.光程差值爲0時,沒有光穿過檢偏器;光程差值等于波長一半時,穿過的光達到最大值.於是在灰色的背景上,標本結構呈現出亮暗差.爲了使影像的反差達到最佳狀態,可通過調節DIC滑行器的縱行微調來改變光程差,光程差可改變影像的亮度.調節DIC滑行器可使標本的細微結構呈現出正或負的投影形象,通常是一側亮,而另一側暗,這便造成了標本的人爲三維立體感,類似大理石上的浮雕.

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