哪位大神幫忙做下這個題目「設計抗除草劑轉基因黃豆的研究方案」?

題目:

哪位大神幫忙做下這個題目「設計抗除草劑轉基因黃豆的研究方案」?

解答:

首先:獲得抗除草劑基因
這個基因目前比較普遍,一般很多載體上都有,你如果覺得不好,或者想自己發明一種新的抗除草劑基因亦可以自己調取
其次:將獲得的抗除草劑基因連接到植物表達載體中!
選擇合適的雙子葉植物表達載體,如pBI121等,其多克隆位點前啓動子爲35s等雙子葉植物強啓動子,設計合適的酶切位點,構建用於在大豆中表達的植物表達載體!
之後:將重組載體轉入黃豆中
大豆的轉基因技術比較成熟,從農桿菌轉化法到基因槍法以及PEG法等等.以最常規的農桿菌轉化法爲例,首先需要一套完整的大豆外殖體培養繁殖體系,能使得從受傷的葉片,產生愈傷組織,分化出不定芽,分化出根,煉苗,移植,生長成成熟植株.其次,需要合適的農桿菌,例如EHA105,將重組載體轉入農桿菌感受態中.最後,建立合適的農桿菌轉化體系,可能需要特殊的激素,以及輔助的小分子物質等,這方面的文章海了去了!
最後:轉基因植株的鑑定
一般表達載體上會帶有自己的表達標籤,因此用載體上的標記,如Kan或者GUS作爲標記,再看看能夠抗除草劑,如果這兩者都是陽性的那麼一般來說就轉基因成功了,具體的分子生物學鑑定是:1:Southern檢測,2:RT-PCR檢測,3:T3代純系檢測!
PS:如果有特殊用途,還需要田間釋放試驗和小鼠病理學實驗,證明你的轉基因大豆的生物安全性!

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