只要能獲得相同的粘性末端,可以用不同種限制性核酸內切酶來切割嗎?
題目:
只要能獲得相同的粘性末端,可以用不同種限制性核酸內切酶來切割嗎?
雖然粘性末端相同,但是用不同限制性核酸內切酶獲得的目的基因就不同了啊?這樣不就無法獲得實驗所需的目的基因了麼?爲什麼可以呢?
解答:
限制酶識別的是鹼基序列並切割,只要切割出來的粘性末端相同那麼目的基因就是一樣的.
如果你的意思是不同的限制酶切割的末端不同,那麼只要不切到目的基因都不影響.切割的時候會保留目的基因兩端的一些其他鹼基對,並不是貼著目的基因切割
再問: 我的意思是用不同的限制性核酸內切酶得到相同的粘性末端,其中的基因會不會不一樣?如果不一樣那是不是就不可以用不同限制酶來切了呀
再答: 基因是一樣的。因爲你用不同的限制酶切割都只是把目的基因切下來,切的是無用的鹼基對,目的基因沒有改變。
再問: 就是說用不同的限制酶切得目的基因都還是存在的,其中無用的鹼基對不會造成影響是嗎?會什麼會這樣,好暈哦。。
再答: 打個比方,「——=——」這個是一段鹼基對,其中「=」是所需要的目的基因,而「——」是無用的的鹼基序列。限制酶的作用是切割「——」使其分開,最終你獲得的基因是「—=—」。切割的目的是把目的基因保留下來然後裝到載體上,不會破壞它,破壞的只是周圍的鹼基對。
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