植物組培中的MS培養基的製作需要哪些成分
題目:
植物組培中的MS培養基的製作需要哪些成分
解答:
這樣每次使用時,取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀釋,製成培養液.現將製備培養基母液所需的各類物質的量列出,供配製時使用.
大量元素(母液Ⅰ) mg/L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
鐵鹽(母液Ⅲ)
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有機成分(母液Ⅳ)
ⅣA 肌醇 20 000
ⅣB煙酸 100
鹽酸吡哆醇(維生素B6) 100
鹽酸硫胺素(維生素B1) 100
甘氨酸 400
以上各種營養成分的用量,除了母液Ⅰ爲20倍濃縮液外,其餘的均爲200倍濃縮液.
上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液.其中,
母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配製方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢後,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然後再將它們混溶,最後定容到1 L.
母液Ⅲ的配製方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解,然後將兩種溶液混合,並將pH調至5?5,最後定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中.各種母液配完後,分別用玻璃瓶貯存,並且貼上標籤,註明母液號、配製倍數、日期等,保存在冰箱的冷藏室中.
MS培養基中還需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生長調節物質,並且分別配成母液(0?1 mg/mL).其配製方法是:分別稱取這3種物質各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預溶,將6-BA用少量(1 mL)的物質的量濃度爲0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最後分別定容至100 mL,即得質量濃度爲0.1 mg/mL的母液.
配製培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量:母液Ⅰ爲50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL.再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,與各種母液一起放入燒杯中.
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