我現在在學著做腎癌的原代培養,但是覺得細胞都不貼壁的,想請問一下怎樣可以讓細胞更好的貼壁呢?
題目:
我現在在學著做腎癌的原代培養,但是覺得細胞都不貼壁的,想請問一下怎樣可以讓細胞更好的貼壁呢?
解答:
大多數原代貼壁細胞貼壁時間是6h到12h,細胞不貼壁有好多種原因的:
1、如果你用玻璃培養瓶培養的話,有可能你的瓶子沒處理好;建議你用一次性培養瓶,進口的都可以.
2、一般做原代細胞貼壁培養用胰酶消化,消化的程度要掌握好,如果消化時間不到、分散不均勻不貼壁.一般消化有熱消化,就是放在37度里消化,時間比較短不好控制,傳代培養常用.還有就是冷消化放在4度里,一般在幾個小時以上,胰酶濃度也有要求的,一般都用0.125-0.25%之間.PH在7.6左右.
3、還有就是天然培養基的選擇,就是血清種類,血清能夠使細胞貼壁,並且提供細胞生長的重要營養成分.
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