cik細胞療法,cik細胞療法具體治療的方法!

題目：

cik細胞療法,cik細胞療法具體治療的方法!

解答：

DCCIK細胞抗腫瘤的基礎研究及臨牀應用進展,309國際腫瘤治療中心爲您詳細介紹：
樹突狀細胞(dendritic cells,DC)分布於除腦和睪丸以外的身體的任何組織,是目前所知的功能最強大的專職抗原遞呈細胞(antigen presenting cells,APC),亦是體內唯一具有激活幼稚T淋巴細胞誘導初次免疫應答能力的APC.
細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine-induced kil1er,CIK)是將人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子(如抗IFN、CD3McAb、IL-2、IL—la等)共同培養後獲得的一羣異質細胞.由於這種細胞同時表達CD3和CD56兩種膜蛋白分子,故又稱自然殺傷(NK)細胞樣T淋巴細胞,兼具有T淋巴細胞強大的殺瘤活性和NK細胞的非主要組織相容性複合體(major histo—corn—patibility complex,MHC)限制性殺瘤特點舊1.它是迄今發現的所有免疫效應細胞中,增殖能力最強、細胞毒活性較強的細胞.
1 CIK/DC細胞的生物學特性及抗腫瘤機制
成熟的DC細胞表面有許多樹突樣不規則突起,表面具有豐富的有助於抗原提呈的分子,如MHC I、Ⅱ類分子,共刺激分子B7-l、B7—2,細胞黏附分子ICAM．1、ICAM．3以及淋巴細胞功能相關抗原LFA-1.LFA-3等.在混合淋巴細胞反應中,既能激活MHC相同的自身反應性T細胞,又能激活MHC不同的同種反應性T細胞,而其最大特點是能夠顯著刺激初始型T細胞(Naive T cells)增殖並建立初級免疫應答,具有向局部淋巴細胞T細胞區遷移的能力.DC細胞激發T細胞增殖及抗原遞呈能力是巨噬細胞和B細胞的100—1000倍.體外培養獲得的DC與純化的體內成熟DC具有同樣的抗原遞呈功能,這是DC用於臨牀治療惡性腫瘤的基礎.
CIK抗腫瘤作用機制還未完全明了,目前的研究顯示CIK可通過3種途徑發揮殺瘤,溶瘤的作用,即:①CIK細胞對腫瘤細胞的直接殺傷作用｡可能是通過黏附因子lfa/icam-1途徑與腫瘤細胞結合後,分泌含大量blt酯酶的顆粒｡這些顆粒能穿透靶細胞膜,導致腫瘤細胞的裂解｡②進入體內活化的CIK細胞可分泌多種細胞因子,不僅對腫瘤細胞有直接抑制作用,而且還可通過調節免疫系統間接殺傷瘤細胞｡此外,CIK細胞還能分泌Il-2､Il-6､Inf-α及gm-csf等一些細胞因子,增強細胞毒作用｡③誘導腫瘤細胞凋亡及壞死｡CIK細胞能活化腫瘤細胞凋亡基因,使得flip､bcl-2､bcl-xl､dad1和survivin基因表達上調｡此外,CIK細胞表達的fasl可誘導腫瘤細胞凋亡,但由於此細胞有抗凋亡基因的表達,因此在體內能抵抗fasl陽性腫瘤細胞對CIK的反作用,故CIK能對腫瘤細胞發揮持久的溶瘤作用｡
腫瘤患者一般存在功能性的DC缺乏.腫瘤細胞對這些免疫效應細胞發生抵抗導致過繼免疫治療療效不佳,而DC作爲體內功能強大的專職抗原遞呈細胞,在細胞毒性T細胞的活化過程中發揮著重要的作用.因此,設想可將CIK細胞和DC聯合起來治療惡性腫瘤,從而發揮協同抗腫瘤作用.而且實驗還證實,DC與CIK細胞通過共培養可降低CIK細胞羣中的免疫抑制T細胞(Treg即CD4+CD25+細胞)而達到削弱Treg對抗腫瘤免疫細胞的抑制作用.
CIK細胞和DC共培養能顯著增加樹突狀細胞和共刺激分子遞呈抗原的特異性.此外,兩者共培育還能促進樹突狀細胞IL-12的分泌和CIK細胞的細胞毒性,而IL-12攝取阻斷則會減弱CIK細胞的細胞毒性.DC可促進CIK細胞高表達CD28和CD40及其配體(CD40L),這對介導DCCIK細胞的細胞毒活性有重要意義.研究中觀察到DC與CIK細胞的共培養會增加CIK細胞的CD3+CD56+雙陽性細胞的比例和殺瘤活性可能與DC高分泌IL-12,使培養體系中IL-12水平增高有關.而IL-12能誘導CIK細胞分泌IFN-γ,按進一步激活NKT細胞和誘導ThI型免疫應答.
2 DCCIK細胞在腫瘤治療中的基礎及臨牀研究
迄今已應用DCCIK細胞對多種惡性腫瘤開展相關基礎及臨牀研究,其中部分研究已經得到了一些令人鼓舞的結果.
2．1 消化系統腫瘤 用CAl99抗原負載成熟的DC,與CIK細胞共培養後,與同源同期的CIK細胞進行比較,發現其對CIK耐受的胰腺癌細胞殺傷活性有顯著提高,與未經抗原肽處理的DC與CIK細胞共培養的細胞相比,殺傷活性也有提高,提示經共培養的CIK細胞中有抗原特異性CTL亞羣的存在.
採集30例肝癌患者外周血分離出CIK細胞回輸患者體內,23例出現發熱,持續時間2—8h,大部分自行消退,無其他不良反應.CIK細胞治療後CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+和CD25+細胞比例明顯升高,而且DCl和DC2細胞的比例也上升,大部分患者臨牀症狀明顯改善.
利用抗原負載DC細胞刺激CIK細胞治療進展期胃癌患者25例,25例均可評價療效.研究結果顯示全組無CR者,PR16例,SD 5例,PD 4例,總有效率64％(16／25).最常見的毒副反應爲發熱,發生率爲48％(12／25),經對症處理後均好轉.未見其他明顯不良反應.
2. 2 呼吸系統腫瘤
對10例肺腺癌患者胸水來源樹突狀細胞和外周血CIK細胞共培養後的細胞毒活性研究發現,癌性胸腔積液中的DC前體細胞可在體外通過細胞因子誘導獲得功能性的DC.用腫瘤細胞凍融抗原衝擊癌性胸腔積液來源的DC可以增加CIK細胞的體外特異性殺傷力,在一定程度上抑制了腫瘤細胞的生長.
應用Dc和CIK共同培養後作用於肺腺癌細胞spe—A1的實驗研究表明,CIK—A—DC的殺傷活性最強爲91．3％,明顯高於單純CIK的59．7％和DCCIK的79．8％(P值分別爲0．025和0．042),提示C1K-A．DC細胞對腫瘤殺傷的特異性.而DCCIK的殺傷活性爲79．8％,也高於單純CIK對照組59.7％(P=0．034),說明DC具有明顯增強CIK細胞殺瘤活性的功能.
2．3 其他系統腫瘤
用負載自體腫瘤細胞裂解物的DC疫苗聯合CIK治療晚期腎癌10例,所有患者治療2個月後CD3+、CD4+、CD4+／CD8+和CD56+均明顯提高,說明負載自體腫瘤細胞裂解物的DC疫苗聯合CIK細胞治療能提高晚期腎癌患者特異性和非特異性的細胞免疫功能.治療過程中除了個別患者出現了•過性的輕微發熱和畏寒外,無明顯不良反應發生.
從乳腺癌患者淋巴結中分離和誘導培養出DC細胞後,經自身腫瘤擾原衝擊後能明顯提高CIK細胞對自身腫瘤細胞的殺傷活性,其機制可能是通過CD3單抗激活CIK產生第一信號,DC表面CD80、CD40等共刺激分子提供第二信號,共同促發CIK的殺傷活性.束永前等心21應用CIK細胞與DC細胞聯合治療晚期各類實體腫瘤患者40例,症狀均有不同程度的改善,而無明顯毒副作用.
3 DCCIK細胞研究應用前景
? CIK細胞與有溶瘤作用的病毒相結合能產生強大的協同抗腫瘤作用,可一定程度上克服靶向生物治療中存在的遞呈及定向等難題,有望成爲一種更爲有效的腫瘤治療方法｡CIK細胞過繼免疫療法作爲一個新的治療手段､治療方案和標準,尚待進一步規範和統一｡作用機制､毒副作用､應用時機､給藥途徑和方法等問題有待進一步探討｡但毫無疑問,細胞過繼免疫治療與手術､化療､放療有機結合,合理安排將爲腫瘤治療帶來新的曙光｡
最新研究顯示DC細胞與CIK細胞共培養後,提高了細胞的增殖速度和殺傷活性,且使其對腫瘤細胞的殺傷作用更具特異性.而且DCCIK細胞對於血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系統等多個系統腫瘤細胞均有殺傷作用.
目前,常規進行CIK細胞、DC細胞或DC-CIK細胞的培養技術都是首先用血細胞分離機體外循環病人4000-8000毫升外周血,提取出外周血里的單個核細胞,然後在GMP實驗室進行細胞培養獲得具有抗癌活性的CIK、DC或DC-CIK免疫細胞.此過程中用血細胞分離機大劑量提取腫瘤病人外周血中的單個核細胞（幼稚細胞）可能會對病人的免疫系統造成損傷,臨牀操作時具有較大風險,很多腫瘤病人由於身體虛弱而無法完成此過程.要想克服這一困難,唯有運用極高極嚴格的的細胞培養技術.讓腫瘤患者獲得無風險無損傷的腫瘤免疫細胞治療成爲解放軍309醫院國際腫瘤治療中心所有醫護人員和研發人員的責任,經過兩年多幾百次的實驗,終於取得了重大突破,實現了DC-CIK細胞的高效率培養,培養效率比常規技術提高了百倍.現在只需要採集病人40毫升左右的外周血,就可以培養出1010個DC-CIK細胞,明顯優於常規的培養方法,其效應細胞CD3+CD56+高達30%以上.DC-CIK抗癌細胞實驗表明,DC-CIK細胞的殺癌細胞的殺傷活性明顯高於CIK細胞,與血細胞分離機採集PBMC方法培養的DC-CIK細胞癌細胞活性相當.
我們堅信,生物免疫細胞治療已經開闢了癌症治療的新天地,而309醫院國際腫瘤治療中心的最新一代DC-CIK腫瘤免疫細胞治療技術,更是讓廣大患者看到了康復的希望!