用western檢測真核表達的帶有flag標籤的融合蛋白時,能用目的蛋白本身的抗體進行檢測,但用flag抗體確無法

題目：

用western檢測真核表達的帶有flag標籤的融合蛋白時,能用目的蛋白本身的抗體進行檢測,但用flag抗體確無法
在確保western條件沒有問題的情況下，我在檢測N端帶有flag標籤的融合蛋白時，用目的蛋白本身的抗體能檢測到蛋白的表達，而用抗flag的抗體卻無法檢測到目的大小的條帶，flag標籤是載體自帶的，抗體也是經驗證無誤的，我感到很困惑的是，爲什麼用flag的抗體檢測不到目的條帶呢？

解答：

看你的flag抗體是否有問題,我是做抗體生產的,原來開發flag抗體時就會對其進行C端、N端、M端的Qc檢測,正常情況下三端都需要有識別,我擔心你的抗flag抗體有可能不識別N端,還有一種可能就是你的融合蛋白不含flag標籤.你可以從這兩個方面入手解決,至於你運用什麼實驗設計,我想你應該完全沒問題.預祝你能夠順利解決此疑問.