PCR 引物設計,在擴增一個基因片段,1200bp左右,編碼區1000個bp左右.由於上游引物GC含量高,我想分兩段擴增

題目：

PCR 引物設計,
在擴增一個基因片段,1200bp左右,編碼區1000個bp左右.由於上游引物GC含量高,我想分兩段擴增.設計一個引物,下游設計一個引物,上下游引物間想穿插（包含一定共同片段）,這樣成嗎.

解答：

當然可以咯,不過我沒明白爲什麼上游引物GC rich跟分兩段擴增有什麼關係,1.2K一次擴增是完全沒有問題的,如果上游引物出現GC rich的情況,那麼可以考慮在更加上游的地方設計引物啊,在這個基因外測的參考序列上設計引物就ok咯