關於信號肽的問題.首先,我有幾段基因序列,通過軟體分析,已經確認其中沒有信號肽序列.爲了構建分泌型抗體的載體,我需要在基

題目:

關於信號肽的問題.
首先,我有幾段基因序列,通過軟體分析,已經確認其中沒有信號肽序列.爲了構建分泌型抗體的載體,我需要在基因前端加上信號肽序列,我想問的是,加什麼信號肽序列好一些,是通過什麼方法確定一個基因加什麼信號肽的,另外,確定了用某個信號肽,我應該去哪裡查找對應的基因序列呢.

解答:

首先要確定表達宿主,你的基因要是真核生物的基因,最好還是用酵母做宿主表達目的蛋白.
選擇信號肽序列是要看宿主的種類而定,
如果沒有信號肽序列,可以考慮利用酵母的某些分泌蛋白或者膜蛋白的信號肽序列作爲你的基因的信號肽,如釀酒酵母的轉換酶,還有a配對因子(AMF)的信號肽序列.
如果你想用大腸桿菌做宿主,那可以用外膜蛋白,如ompA,但是大腸桿菌的蛋白分泌效率低.
通常要做分泌型蛋白的表達,所購買的相應的載體上已經準備了信號肽序列,如果沒有的話,要去NCBI查找相應的基因信號肽序列,自己做重組.

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